试剂盒组成
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试剂盒组分
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20次×25μl体系
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50次×25μl体系
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Reaction Master Mix
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220μl
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550μl
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10×Beyond Green Solution
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35μl
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75μl
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用户手册
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1份
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1份
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存储条件
该试剂盒在4℃中可保存3个月。如需长期保存，请将两组分置于-20℃冰柜，另外，10×Beyond Green Solution因对光源敏感，会造成染料的降解，因此需避光保存于-20℃，否则会影响实验结果。
自备试剂及实验仪器
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1、
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DNA或cDNA模板
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2、
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PCR引物
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3、
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超纯水
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4、
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移液器
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5、
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台式离心机
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PCR前操作步骤
1、 将各组分置于冰上完全融解；
2、 颠倒混匀各组分，以避免由于盐离子分层对实验结果的影响；
3、 在开盖前，对已混匀的各组分进行短暂低速离心；
4、 20次反应Kit： 将27.5μl的10×Beyond Green Solution加入到220μl的Reaction Master Mix中，彻底混匀后置于冰上备用。
50次反应Kit： 将68.75μl的10×Beyond Green Solution加入到550μl的Reaction Master Mix中，彻底混匀后置于冰上备用。
100次反应Kit： 将137.5μl的10×Beyond Green Solution加入到1100μl的Reaction Master Mix中，彻底混匀后置于冰上备用。
200次反应Kit： 将275μl的10×Beyond Green Solution加入到2200μl的Reaction Master Mix中，彻底混匀后置于冰上备用
【注意】：该试剂盒不能用于探针法的荧光定量PCR实验；
反应体系
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组成成分
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50μl体系
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25μl体系
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20μl体系
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终浓度
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Reaction Master Mix/10×Beyond Green Solution
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22.5μl
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11.25μl
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9μl
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1×
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Forward Primer
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-
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-
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-
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100-300nM
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Reverse Primer
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-
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-
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-
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100-300nM
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模板
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-
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ng-pg
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超纯水
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至50μl
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至25μl
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至20μl
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-
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反应条件
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95℃
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5分钟
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1个循环
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95℃
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15秒
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55-65℃
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30秒
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35-40个循环
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68℃
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30秒（收集荧光值）
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融解曲线65~100℃
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【注明】：在融解曲线阶段，每几秒收集一次荧光数据由使用仪器类型和实验目的而定。 |