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MicroRNAsmiRNAs)是一类长约19-24核苷酸的非编码的单链RNA 分子,它们广泛存在于从植物、线虫到人类的细胞中。MiRNAs是一类进化上保守的、在生命中起着重要调控作用的分子,它们能有效地抑制相关蛋白质的合成,使靶mRNA 的降解,导致基因沉默。

应用领域:

    miRNAs控制着包括细胞增殖、凋亡、器官发生、发育、造血以及肿瘤发生等若干途径。研究发现,miRNA可能同时具有肿瘤抑制因子和源癌基因的功能,并且可能在癌症的诊断和治疗中发挥重要的作用。miRNA可以通过影响或者调控细胞增殖、分化过程中的信使RNA和关键蛋白质等参与细胞的发育。此外,miRNA对多种植物激素的调控作用对于植物体的发育也具有重要意义。

    下面我们列举了miRNA近年来在一些生物领域的应用的文献,以供参考:

    miRNAs与癌症

    MicroRNA-34a Inhibits Glioblastoma Growth by Targeting Multiple Oncogenes. Cancer Res. 2009 Sep 22.

    MicroRNA-34a通过调节多个原癌基因抑制胶质母细胞瘤生长。

    Microarray analysis shows that some microRNAs downregulate large numbers of target mRNAs. Nature. 2005 Feb 17;433(7027):769-73.

    微芯片分析表明microRNAs下调大量靶mRNAs表达。

    miRNAs与干细胞:

    Muscle stem cell behavior is modified by microRNA-27 regulation of Pax3 expression. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Aug 11;106(32):13383-7.

    microRNA-27通过调节Pax3表达影响肌肉干细胞生物学行为。

    Downregulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cells. Cell. 2009 Aug 7;138(3):592-603.

    miRNA-200c表达下调将乳腺癌干细胞和正常干细胞联系到一起。

    miRNAs与分子标记:

    Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Jan 6;106(1):E5.

    外周血microRNAs可以作为癌症检测稳定的分子标记。

    Differential expression of microRNAs in plasma of patients with colorectal cancer: a potential marker for colorectal cancer screening. Gut. 2009 Oct;58(10):1375-81.

    结肠癌病人血浆差异表达microRNAs:一个结肠癌筛查潜在的分子标记。

    miRNAs与药学:

    Incorporation of 5-fluorouracil into U2 snRNA blocks pseudouridylation and pre-mRNA splicing in vivo. Nucleic Acids Res. 2007;35(2):550-8.

    5氟尿嘧啶插入U2 snRNA分子在体内阻断了假尿苷化和前体mRNA剪切。

    miRNAs与植物逆境胁迫:

    Infection and coaccumulation of tobacco mosaic virus proteins alter microRNA levels, correlating with symptom and plant development. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 Jul 17;104(29):12157-62.

    烟草花叶病毒蛋白的感染和积累改变了microRNA表达水平,与植物发病症状和发育相关。

 

    目前在市场上,常见的miRNAs检测技术包括Northern BlotMicroarraysrealtime PCR三种方法,下面是几种方法比较:

 

Northern Blot

Microarrays(芯片法)

Realtime PCR

常规经典方法,易于操作

通量小,常用于芯片结果验证

需大量样品(μg级)

动力学范围低,半定量

错配杂交问题

放射性

通量高

可测动力学范围较宽

需大量样品(约5μg/array

很难区分前体miRNA和成熟miRNA,对类似结构miRNA分辨率差,需要进一步验证

通量较高

只需微量样品

非常宽的动力学范围

高灵敏度,高特异性

如何扩增miRNA是关键(专利)

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